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Chapters
- 00:05Title
- 00:54Lyse Bacterial Pellets Expressing Human Recombinant G4 Resolvase1 (rG4R1)
- 03:06Prepare G4-magnetic Beads
- 04:07Bind Histidine-tagged rG4R1 to Cobalt Beads
- 05:47Elute rG4R1 from Cobalt Beads
- 07:07Bind rG4R1 to G4-bound SPB and Elute in an ATP-dependent Manner
- 08:55Results: Analysis and Quantification of Catalytically Active, Purified rG4R1
- 10:06Conclusion
G4 Resolvase1 liga-se a (G4) estruturas G-quadruplex com mais apertados afinidade reportada para uma proteína de ligação e G4 representa a maior parte da actividade de desenrolamento-G4 ADN em células HeLa. Nós descrevemos um protocolo romance que aproveita a afinidade e atividade desenrolamento dependente de ATP G4-Resolvase1 para purificar especificamente G4R1 recombinante cataliticamente ativo.
