JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:05Title
- 00:54Lyse Bacterial Pellets Expressing Human Recombinant G4 Resolvase1 (rG4R1)
- 03:06Prepare G4-magnetic Beads
- 04:07Bind Histidine-tagged rG4R1 to Cobalt Beads
- 05:47Elute rG4R1 from Cobalt Beads
- 07:07Bind rG4R1 to G4-bound SPB and Elute in an ATP-dependent Manner
- 08:55Results: Analysis and Quantification of Catalytically Active, Purified rG4R1
- 10:06Conclusion
G4 Resolvase1 binder til G-quadruplex (G4) strukturer med de strammeste rapporterede affinitet for et G4-bindende protein og repræsenterer størstedelen af G4-DNA unwinding aktivitet i HeLa-celler. Vi beskriver en hidtil ukendt protokol, der udnytter affinitet og ATP afhængige afvikling aktivitet af G4-Resolvase1 til specifikt oprense katalytisk aktivt rekombinant G4R1.
