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Protein-tRNA-Agarose-Gel-Retardations-Assays für die Analyse der<em> N.</em<sup> 6</sup> -threonylcarbamoyladenosin TcdA-Funktion
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JoVE 신문 생화학
Protein-tRNA Agarose Gel Retardation Assays for the Analysis of the N6-threonylcarbamoyladenosine TcdA Function
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Protein-tRNA-Agarose-Gel-Retardations-Assays für die Analyse der<em> N.</em<sup> 6</sup> -threonylcarbamoyladenosin TcdA-Funktion

DOI:
10.3791/55638-v

•

08:03 min

•

June 21, 2017

•

, , , ,
1Department of Physical Chemical Biology, Center for Biological Research (CIB-CSIC),Spanish National Research Council (CSIC), 2Department of Immunology,Complutense University School of Medicine, 3Abvance Biotech srl

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:13Preparation of the tRNA
  • 02:44Lysis, Extraction, and Purification of tRNA(UUU)
  • 04:05Sample Preparation
  • 05:09Gel Electrophoresis and Staining to Observe tRNA-Protein Interaction
  • 06:33Results: Evaluation of the Interaction Between TcdA and tRNA(UUU)
  • 07:22Conclusion

Summary

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Ein Protokoll wird für die Produktion von tRNA (UUU) und die Analyse von tRNA (UUU) im Komplex mit dem Enzym TcdA durch Agarose-Gel-Retardierungs-Assays vorgestellt.

Tags

Protein-tRNA InteractionAgarose Gel Retardation AssayRNA-binding ProteinsTcdA FunctionRNA BiologyProtein-RNA ComplexesE. Coli BL21 DE3PET-23D EC Triple-UIPTG InductionCell LysisAcid Phenol Extraction

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