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Metodi per classificare i foci citoplasmatici come granuli di stress di mammiferi
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JoVE 신문 생물학
Methods to Classify Cytoplasmic Foci as Mammalian Stress Granules
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Metodi per classificare i foci citoplasmatici come granuli di stress di mammiferi

DOI:
10.3791/55656-v

•

09:33 min

•

May 12, 2017

•

, , , , ,
1Division of Rheumatology, Immunology, and Allergy,Brigham and Women’s Hospital, 2Department of Medicine,Harvard Medical School, 3Department of Histology and Embryology,Poznan University of Medical Sciences, 4The Broad Institute of Harvard and M.I.T.

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:52Stressing Cells
  • 02:19Cell Fixation and Staining
  • 05:23Fluorescence In Situ Hybridization
  • 07:43Results: Stress Granules Formation in Sodium Arsenite- and Vinorelbine-treated Cells
  • 08:46Conclusion

Summary

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Granuli di stress (SG) sono strutture citoplasmatiche non membrane che si formano in cellule esposte a varie sollecitazioni. Gli SG contengono mRNA, proteine ​​legate all'RNA, piccole subunità ribosomali, fattori correlati alla traduzione e varie proteine ​​di segnalazione cellulare. Questo protocollo descrive un flusso di lavoro che utilizza diversi approcci sperimentali per rilevare, caratterizzare e quantificare SG in buona fede .

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Keywords: Cytoplasmic FociStress GranulesMammalian CellsU-2 OS CellsSodium ArseniteVinorelbineCycloheximidePuromycinImmunofluorescenceCell FixationCell Permeabilization

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