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Métodos para clasificar los focos citoplasmáticos como gránulos de estrés de mamíferos
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JoVE 신문 생물학
Methods to Classify Cytoplasmic Foci as Mammalian Stress Granules
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Métodos para clasificar los focos citoplasmáticos como gránulos de estrés de mamíferos

DOI:
10.3791/55656-v

•

09:33 min

•

May 12, 2017

•

, , , , ,
1Division of Rheumatology, Immunology, and Allergy,Brigham and Women’s Hospital, 2Department of Medicine,Harvard Medical School, 3Department of Histology and Embryology,Poznan University of Medical Sciences, 4The Broad Institute of Harvard and M.I.T.

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:52Stressing Cells
  • 02:19Cell Fixation and Staining
  • 05:23Fluorescence In Situ Hybridization
  • 07:43Results: Stress Granules Formation in Sodium Arsenite- and Vinorelbine-treated Cells
  • 08:46Conclusion

Summary

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Los Gránulos de Estrés (SG) son estructuras citoplasmáticas no membranosas que se forman en células expuestas a una variedad de tensiones. SGs contienen mRNAs, proteínas de unión a ARN, pequeñas subunidades ribosómicas, factores relacionados con la traducción, y diversas proteínas de señalización celular. Este protocolo describe un flujo de trabajo que utiliza varios enfoques experimentales para detectar, caracterizar y cuantificar SGs de buena fe .

Tags

Keywords: Cytoplasmic FociStress GranulesMammalian CellsU-2 OS CellsSodium ArseniteVinorelbineCycloheximidePuromycinImmunofluorescenceCell FixationCell Permeabilization

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