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표적화 된 Ca를 이용한 ER / SR 칼슘 방출 모니터링<sup> 2+</sup> 센서 캐쳐<sup> +</sup
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JoVE 신문 생물학
Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+
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표적화 된 Ca를 이용한 ER / SR 칼슘 방출 모니터링<sup> 2+</sup> 센서 캐쳐<sup> +</sup

DOI:
10.3791/55822-v

•

12:30 min

•

May 19, 2017

•

, , ,
1Department of Chemistry, Center of Diagnostics and Therapeutics (CDT),Georgia State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:30Transfection of HEK293 Cells
  • 02:43Transfection of C2C12 Myoblast Cells
  • 04:10Preparation of Slide and Fluorescence Microscope
  • 06:54Imaging Drug-induced Ca2+ Transients and In Situ Kd Calibration
  • 10:14Results: In Situ Kd of CatchER+ in C2C12 Myoblast Cells
  • 11:32Conclusion

Summary

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우리는 실시간 형광 현미경을 사용하여 HEK293 및 골격근 C2C12 세포의 소포체 / sarcoplasmic reticulum (ER / SR)에서 빠른 칼슘 과도 현상을 모니터링하기위한 우리의 표적 유전자 코딩 칼슘 지시약 (GECI) CatchER +의 적용 을위한 프로토콜을 제시합니다. 현장 K d 측정 및 교정을위한 프로토콜도 논의됩니다.

Tags

ER/SR Calcium ReleaseCatchER+HEK293 CellsC2C12 CellsCalcium SignalingCalcium TransientsGECICell TransfectionFluorescence ImagingCalcium-related Diseases

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