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Seguimiento de la liberación de calcio ER / SR con el Ca<sup> 2+</sup> Sensor de Captura<supUnesdoc.unesco.org unesdoc.unesco.org</sup
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JoVE 신문 생물학
Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+
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Seguimiento de la liberación de calcio ER / SR con el Ca<sup> 2+</sup> Sensor de Captura<supUnesdoc.unesco.org unesdoc.unesco.org</sup

DOI:
10.3791/55822-v

•

12:30 min

•

May 19, 2017

•

, , ,
1Department of Chemistry, Center of Diagnostics and Therapeutics (CDT),Georgia State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:30Transfection of HEK293 Cells
  • 02:43Transfection of C2C12 Myoblast Cells
  • 04:10Preparation of Slide and Fluorescence Microscope
  • 06:54Imaging Drug-induced Ca2+ Transients and In Situ Kd Calibration
  • 10:14Results: In Situ Kd of CatchER+ in C2C12 Myoblast Cells
  • 11:32Conclusion

Summary

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Presentamos protocolos para la aplicación de nuestro indicador de calcio codificado genéticamente (GECI) CatchER + para el monitoreo de transitorios rápidos de calcio en el retículo endoplasmático / sarcoplasmático (ER / SR) de HEK293 y células C2C12 de músculo esquelético usando microscopía de fluorescencia en tiempo real. También se discute un protocolo para la medición y calibración in situ K d .

Tags

ER/SR Calcium ReleaseCatchER+HEK293 CellsC2C12 CellsCalcium SignalingCalcium TransientsGECICell TransfectionFluorescence ImagingCalcium-related Diseases

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