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Um Sistema Híbrido de Levedura-Um Modificado para Estudos de Interação de DNA de Complexo de Proteínas Heteroméricas
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JoVE 신문 생화학
A Modified Yeast-one Hybrid System for Heteromeric Protein Complex-DNA Interaction Studies

Um Sistema Híbrido de Levedura-Um Modificado para Estudos de Interação de DNA de Complexo de Proteínas Heteroméricas

DOI:
10.3791/56080-v

•

10:47 min

•

July 24, 2017

•

, ,
1Department of Neurology,University of Southern California, 2Section of Cell and Developmental Biology,University of California San Diego

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:40Preparation of Competent Cells
  • 02:40Co-transformation of Cells by Heat Shock
  • 04:39Transferring Cells onto New Plates
  • 05:25Preparing Culture for Measuring β-galactosidase Activity
  • 08:14Measuring β-galactosidase Activity
  • 09:07Results: Y1.5H Assay Detects Heteromeric Protein-DNA Interactions
  • 09:50Conclusion

Summary

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O ensaio de um híbrido de levedura modificado descrito aqui é uma extensão do ensaio de híbrido (Y1H) de levedura clássico para estudar e validar a interação de proteína-proteína heteromérica-DNA em um sistema heterólogo para qualquer estudo de genômica funcional.

Tags

Yeast-one HybridHeteromeric Protein ComplexDNA InteractionFunctional GenomicsProtein-DNA InteractionsCo-transformationTE Lithium AcetateYPDA MediumCompetent CellsNormalization Control

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