The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

Nan Zhang; Liakot A Khan; Edward Membreno; Gholamali Jafari; Siyang Yan; Hongjie Zhang; Verena Gobel

doi:10.3791/56100

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सी. एलिगेंस आंत एक मॉडल के रूप में एक सेलुलर लुमेन Morphogenesis के लिए और Vivo में एक-कोशिका स्तर पर ध्रुवीकरण झिल्ली की उत्पत्ति: लेबलिंग द्वारा एंटीबॉडी धुंधला, RNAi के नुकसान का-समारोह विश्लेषण और इमेजिंग

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Developmental Biology

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The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

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सी. एलिगेंस आंत एक मॉडल के रूप में एक सेलुलर लुमेन Morphogenesis के लिए और Vivo में एक-कोशिका स्तर पर ध्रुवीकरण झिल्ली की उत्पत्ति: लेबलिंग द्वारा एंटीबॉडी धुंधला, RNAi के नुकसान का-समारोह विश्लेषण और इमेजिंग

DOI:

10.3791/56100-v

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12:15 min

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October 03, 2017

•

Nan Zhang², Liakot A Khan, Edward Membreno, Gholamali Jafari, Siyang Yan, Hongjie Zhang³, Verena Gobel

¹Mucosal Immunology and Biology Research Center, Developmental Biology and Genetics Core, Massachusetts General Hospital,Harvard Medical School, ²College of Life Sciences,Jilin University, ³Faculty of Health Sciences,University of Macau

Chapters

00:05Title
01:24Introduction to the Accompanying Publication
02:47Nematode Fixation
04:19Nematode Antibody Staining
06:33Applying RNAi to Nematodes Using a Feeding Protocol
07:57Analyzing Phenotypes Using Fluorescence Dissecting Microscopy
08:41Analyzing Phenotypes Using Confocal Microscopy
10:14Results: Immunohistochemistry, RNAi and Microscopic Analysis of Intestinal Apical membrane and Lumen Morphogenesis
11:45Conclusion

Summary

Automatic Translation

पारदर्शी सी एलिगेंस आंत कोशिकीय tubulogenesis के दौरान एकल सेल और उपसेलुलर स्तर पर apicobasal झिल्ली और लुमेन के अध्ययन के लिए एक "vivo में ऊतक चैंबर" के रूप में सेवा कर सकते हैं । इस प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे मानक लेबलिंग, नुकसान की-समारोह आनुवंशिक/RNAi और सूक्ष्म दृष्टिकोण गठबंधन करने के लिए एक आणविक स्तर पर इन प्रक्रियाओं टुकड़े ।