The <em>C. elegans</em> Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and <em>In Vivo </em>Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

Nan Zhang; Liakot A Khan; Edward Membreno; Gholamali Jafari; Siyang Yan; Hongjie Zhang; Verena Gobel

doi:10.3791/56100

Journal

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발생학

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C. 선 충 장 한 모델으로 루멘 Morphogenesis 세포를 단일 세포 수준에서 Vivo에서 편광 막 속: 항 체 얼룩이 지기, RNAi 손실의 기능 분석 및 이미징 라벨

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JoVE 신문 발생학

The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

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C. 선 충 장 한 모델으로 루멘 Morphogenesis 세포를 단일 세포 수준에서 Vivo에서 편광 막 속: 항 체 얼룩이 지기, RNAi 손실의 기능 분석 및 이미징 라벨

DOI:

10.3791/56100-v

•

12:15 min

•

October 03, 2017

•

Nan Zhang², Liakot A Khan, Edward Membreno, Gholamali Jafari, Siyang Yan, Hongjie Zhang³, Verena Gobel

¹Mucosal Immunology and Biology Research Center, Developmental Biology and Genetics Core, Massachusetts General Hospital,Harvard Medical School, ²College of Life Sciences,Jilin University, ³Faculty of Health Sciences,University of Macau

Chapters

00:05Title
01:24Introduction to the Accompanying Publication
02:47Nematode Fixation
04:19Nematode Antibody Staining
06:33Applying RNAi to Nematodes Using a Feeding Protocol
07:57Analyzing Phenotypes Using Fluorescence Dissecting Microscopy
08:41Analyzing Phenotypes Using Confocal Microscopy
10:14Results: Immunohistochemistry, RNAi and Microscopic Analysis of Intestinal Apical membrane and Lumen Morphogenesis
11:45Conclusion

Summary

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투명 한 선 충 C. 소장"vivo에서 조직 챔버를" 다세포 tubulogenesis 동안 단일 세포 및 subcellular 수준 apicobasal 막과 루멘 속 공부에 대 한 될 수 있습니다. 이 프로토콜 표준 라벨을 결합 하는 방법을, RNAi/손실의 기능 유전자 및 분자 수준에서이 프로세스를 해 부 현미경 접근에 설명 합니다.

C. 선 충 장 한 모델으로 루멘 Morphogenesis 세포를 단일 세포 수준에서 Vivo에서 편광 막 속: 항 체 얼룩이 지기, RNAi 손실의 기능 분석 및 이미징 라벨

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