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Analisi di attività della polimerasi del DNA usando il vicino infrarosso fluorescente DNA con etichettato visualizzato tramite elettroforesi su Gel di acrilammide
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JoVE 신문 생화학
DNA Polymerase Activity Assay Using Near-infrared Fluorescent Labeled DNA Visualized by Acrylamide Gel Electrophoresis
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Analisi di attività della polimerasi del DNA usando il vicino infrarosso fluorescente DNA con etichettato visualizzato tramite elettroforesi su Gel di acrilammide

DOI:
10.3791/56228-v

•

07:38 min

•

October 06, 2017

•

,
1Department of Chemistry,W.M. Keck Science Department of Claremont Mckenna, Pitzer, and Scripps College

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:37DNA Polymerase Activity Assay
  • 01:40Preparing the Plates
  • 02:46Pouring the Gel
  • 06:30Results: DNA Polymerase Activity Assay
  • 07:17Conclusion

Summary

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Questo protocollo descrive la caratterizzazione della sintesi di DNA polimerasi di DNA modificato attraverso l'osservazione dei cambiamenti al DNA fluorescente contrassegnato vicino infrarosso mediante elettroforesi su gel e gel di imaging. Gel di acrilammide sono usati per l'imaging ad alta risoluzione della separazione degli acidi nucleici breve, che migrano a velocità diverse a seconda delle dimensioni.

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Keywords: DNA PolymeraseActivity AssayNear-infrared FluorescentAcrylamide Gel ElectrophoresisDNA SynthesisDNA ModificationsTemperature ControlBuffer PreparationQuenching ReactionAcrylamide Gel CastingGel Plate PreparationSpacersGel TapeWater Level Marking

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