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O ensaio de reconstituição de organoides (ORA) para a análise funcional do tronco Intestinal e nicho de células
JoVE 신문
생체공학
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JoVE 신문 생체공학
The Organoid Reconstitution Assay (ORA) for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells
DOI:

09:38 min

November 20, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:10Isolation of Small Intestinal Crypts
  • 04:02Single Cell Preparation, Flow Cytometry, and Plating
  • 07:34Results: Effect of siRNA Medicated Knockdown of Apc in Lgr5+ Cells
  • 08:29Conclusion

Summary

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Organoides intestinal culturas são estabelecidas de criptas toda e não permitem a análise de auto-renovação e diferenciação em uma célula específica de moda. Este protocolo descreve a reconstituição da haste classificada (Lgr5+) e células (Paneth), que dão origem a organoids permitindo sua prévia modificação genética e bioquímica e análise funcional de nicho.

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