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El ensayo de reconstitución de organoides (ORA) para el análisis funcional del tallo Intestinal y las células del nicho
JoVE 신문
생체공학
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JoVE 신문 생체공학
The Organoid Reconstitution Assay (ORA) for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells
DOI:

09:38 min

November 20, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:10Isolation of Small Intestinal Crypts
  • 04:02Single Cell Preparation, Flow Cytometry, and Plating
  • 07:34Results: Effect of siRNA Medicated Knockdown of Apc in Lgr5+ Cells
  • 08:29Conclusion

Summary

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Organoide intestinal culturas establecen de criptas todas y no permite el análisis de auto renovación y diferenciación de una manera específica de la célula. Este protocolo describe reconstitución de potencia ordenada (Lgr5+) y lugar (Paneth) células, que dan lugar a organoides permitiendo su modificación bioquímica y genética previa y análisis funcional.

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