Le test TUNEL
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개요
Une des caractéristiques de l’apoptose est la fragmentation de l’ADN nucléaire par les nucléases. Ces enzymes sont activées par des caspases, la famille de protéines qui exécute le programme de mort cellulaire. Essai TUNEL est une méthode qui tire parti de cette fonctionnalité pour détecter les cellules apoptotiques. Dans ce test, une enzyme appelée transférase terminale de deoxynucleotidyl catalyse l’addition de nucléotides dUTP jusqu’aux extrémités 3′ de fragments d’ADN. À l’aide de dUTPs qui sont étiquetés avec des tags chimiques qui peuvent produire la fluorescence ou la couleur, les cellules apoptotiques peuvent être spécifiquement identifiées.
Vidéo de JoVE sur l’essai TUNEL commence par discuter comment cette technique peut être utilisée pour détecter les cellules apoptotiques. Nous passons ensuite à travers un protocole général pour effectuer des essais TUNEL sur coupes tissulaires et visualiser les résultats en utilisant la microscopie à fluorescence. Enfin, plusieurs applications de l’analyse à la recherche actuelle seront couverts.
