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应用三色单分子焦虑研究蛋白质相互作用的相关性

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Using Three-color Single-molecule FRET to Study the Correlation of Protein Interactions

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应用三色单分子焦虑研究蛋白质相互作用的相关性

DOI:

10.3791/56896-v

•

11:22 min

•

January 30, 2018

•

Markus Götz, Philipp Wortmann, Sonja Schmid², Thorsten Hugel

¹Institute of Physical Chemistry,University of Freiburg, ²Department of Bionanoscience, Kavli Institute of Nanoscience Delft,Delft University of Technology

Chapters

00:05Title
00:37Total Internal Reflection Fluorescence Microscope (TIRFM) Flow Chamber Assembly
02:15Three-color smFRET Measurement of Hsp90
05:52Data Analysis
09:08Results: Protein Interactions of Hsp90
10:47Conclusion

Summary

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在这里, 我们提出了一个协议, 以获得三色 smFRET 数据和分析与3D 集成隐马尔可夫模型。通过这种方法, 科学家可以从复杂的蛋白质系统中提取动力学信息, 包括协同或相关的相互作用。

Tags

Keywords: Three-color Single-molecule FRET Protein Interactions Cooperativity Quantitative Biology Protein Complexes Dynamic Interactions Flow Chamber Assembly PEG-biotin Functionalized Slide Multi-color Prism TIRF Microscope EMCCD Camera Configuration

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