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La combinación de Cristalografía de rayos x con dispersión de rayos-x de ángulo pequeño para modelar regiones no estructuradas de Nsa1 de S. Cerevisiae
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JoVE 신문 생화학
Combining X-Ray Crystallography with Small Angle X-Ray Scattering to Model Unstructured Regions of Nsa1 from S. Cerevisiae
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La combinación de Cristalografía de rayos x con dispersión de rayos-x de ángulo pequeño para modelar regiones no estructuradas de Nsa1 de S. Cerevisiae

DOI:
10.3791/56953-v

•

09:15 min

•

January 10, 2018

•

, ,
1Signal Transduction Laboratory, National Institutes of Environmental Health Sciences, Department of Health and Human Services,National Institutes of Health

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:47Nsa1 (Nop7 Associated 1) Protein Purification
  • 03:43Proteolytic Screening
  • 05:14Small-Angle X-Ray Scattering (SAXS) Data Processing, Comparison of Concentration Series, and Ensemble Modeling
  • 07:31Results: Modeling the Disordered C-Terminus Region of Nsa1
  • 08:37Conclusion

Summary

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Este método describe el clonaje, expresión y purificación de Nsa1 recombinantes para la determinación estructural por cristalografía de rayos x y dispersión de rayos-x de ángulo pequeño (SAXS) y es aplicable para el análisis estructural híbrido de otras proteínas que contiene tanto había ordenado y desordenado dominios.

Tags

Keywords: X-ray CrystallographySmall Angle X-ray Scattering (SAXS)Structural AnalysisProtein StructureRecombinant ProteinUnstructured RegionsNsa1S. CerevisiaeHybrid Structural AnalysisProtein FunctionProtein DynamicsProtein AggregationPurificationAffinity ChromatographyGel FiltrationSDS-PAGETEV ProteaseCentrifugal Filtration

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