Efficient Production and Identification of CRISPR/Cas9-generated Gene Knockouts in the Model System <em>Danio rerio</em>

Erin L. Sorlien; Mary A. Witucki; Joseph Ogas

doi:10.3791/56969

Journal

/

유전학

/

Produção eficiente e identificação de CRISPR/Cas9 gerado pelo Gene nocautes no sistema modelo Danio rerio

JoVE 신문
유전학

This content is Free Access.

JoVE 신문 유전학

Efficient Production and Identification of CRISPR/Cas9-generated Gene Knockouts in the Model System Danio rerio

Produção eficiente e identificação de CRISPR/Cas9 gerado pelo Gene nocautes no sistema modelo Danio rerio

DOI:

10.3791/56969-v

•

11:27 min

•

August 28, 2018

•

Erin L. Sorlien, Mary A. Witucki, Joseph Ogas

¹Department of Biochemistry,Purdue University

Chapters

00:05Title
01:09Preparation of CRISPR-reagents for Embryo Microinjection
04:03Microinjection of CRISPR-components into Zebrafish Embryos
06:12Analysis of Efficiency of Indel Formation Using an HMA
08:45Identification and Propagation of Knock-out Lines
09:45Results: Zebrafish Embryos Exhibit a Pigment Defect when Injected with an sgRNA Targeting Tyrosinase at the One Cell Stage
10:32Conclusion

Summary

자동 번역

Genoma alvo edição no sistema modelo Danio rerio (zebrafish) tem sido facilitada pela emergência de abordagens baseadas em CRISPR. Aqui, descrevemos um protocolo simplificado, robusto para a geração e a identificação de alelos CRISPR-derivado absurdo que incorpora o ensaio de mobilidade doheteroduplex e identificação de mutações usando sequenciamento de próxima geração.

Article

Embed

플레이리스트에 추가

Usage Statistics

Criação e Double-stranded mediada por RNA silenciamento de genes na Esconder Beetle,<em> Dermestes maculatus</em

Geração independente dependente da seleção e de genes independentes de CRISPR / Cas9 em células de mamíferos

Um protocolo para a produção de Lentivirus vetores Integrase deficiente CRISPR/Cas9-mediada Gene nocaute em dividir células

Produção e purificação de Baculovirus para aplicação de terapia gênica

Disrupção do Gene altamente eficiente de células progenitoras hematopoiéticas murino e humano por CRISPR/Cas9

Particulas de Lentivirus mediada produção de camundongos transgênicos: um método simples e altamente eficiente para estudo direto dos fundadores

Identificação do elevado-throughput de sequências de genes regulatórios utilizando a próxima geração sequenciamento de conformação Circular cromossoma capturar (4C-seq)