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Puces microfluidiques pour diffusion de lumière dynamique Diffraction de rayons x de cristaux In Situ et In Situ pour série cristallographie

JoVE 신문
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JoVE 신문 화학

Microfluidic Chips for In Situ Crystal X-ray Diffraction and In Situ Dynamic Light Scattering for Serial Crystallography

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Puces microfluidiques pour diffusion de lumière dynamique Diffraction de rayons x de cristaux In Situ et In Situ pour série cristallographie

DOI:

10.3791/57133-v

•

11:48 min

•

April 24, 2018

•

Yannig Gicquel*^1,2, Robin Schubert*^3,4,5, Svetlana Kapis, Gleb Bourenkov, Thomas Schneider, Markus Perbandt⁴, Christian Betzel^4,5, Henry N. Chapman^2,4, Michael Heymann⁷

¹Center for Free Electron Laser Science,DESY, ²Department of Physics,University of Hamburg, ³Institute for Biochemistry and Molecular Biology, Laboratory for Structural Biology of Infection and Inflammation,University of Hamburg, ⁴The Hamburg Center for Ultrafast Imaging,University of Hamburg, ⁵Integrated Biology Infrastructure Life-Science Facility at the European XFEL (XBI), ⁶European Molecular Biology Laboratory, EMBL c/o DESY, ⁷Department of Cellular and Molecular Biophysics,Max Planck Institute of Biochemistry

Chapters

00:04Title
00:38Polydimethylsiloxane (PDMS) Mold Fabrication and In Situ X-ray Chip Fabrication
04:59Fluid Delivery Access Ports and Surface Treatment
06:51Protein Preparation and Crystallization
08:51Results: Crystallization and In Situ X-ray Diffraction of Protein Crystals
10:41Conclusion

Summary

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Ce protocole décrit en détail comment fabriquer et utiliser des dispositifs microfluidiques pour la collecte de données de diffraction des rayons x à la température ambiante. En outre, il décrit comment contrôler la cristallisation de protéines en diffusion dynamique de la lumière et comment traiter et analyser des données de diffraction a obtenu.

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