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Interrupción génica altamente eficiente de las células progenitoras hematopoyéticas murinas y humanas por CRISPR/Cas9
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Highly Efficient Gene Disruption of Murine and Human Hematopoietic Progenitor Cells by CRISPR/Cas9
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Interrupción génica altamente eficiente de las células progenitoras hematopoyéticas murinas y humanas por CRISPR/Cas9

DOI:
10.3791/57278-v

•

08:27 min

•

April 10, 2018

•

, , , ,
1Stem Cells & Regenerative Medicine Center,Baylor College of Medicine, 2Center for Cell and Gene Therapy,Baylor College of Medicine, 3Centro di Ricerca Emato-Oncologica (CREO),University of Perugia, 4Department of Molecular & Human Genetics,Baylor College of Medicine, 5Texas Children’s Hospital & Houston Methodist Hospital

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:05sgRNA Fwd Primer Design, DNA Template Synthesis, and ln Vitro Transcription of sgRNA
  • 03:38Cas9-sgRNA Complexing and Electroporation
  • 05:45Results: Use of Cas9-sgRNA Electroporation Protocol to Study Efficient Knockout of Target Gene
  • 07:48Conclusion

Summary

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Un protocolo para rápido CRISPR/Cas9-mediado interrupción de genes en ratón y células hematopoyéticas primarias humanas se describe en este artículo. Cas9 sgRNA ribonucleoproteínas se introducen a través de electroporación con sgRNAs generado a través de transcripción en vitro y Cas9 comercial. Alta eficiencia edición se logra con tiempo limitado y costos financieros.

Tags

Keywords: CRISPR/Cas9Gene DisruptionHematopoietic Progenitor CellsRibonucleoproteinSingle-guide RNAPCRT7 RNA PolymeraseGene KnockoutPrimary CellsHigh EfficiencyFast TurnaroundCost-effectiveNormal And Malignant HematopoiesisPrimary T-cellsHematopoietic Cell LinesPrimary Leukemia Samples

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