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エクソソームおよび人間の血液からの分離を最適化するためにタンパク質の消化が、限外濾過、サイズ排除クロマトグラフィー
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Protein Digestion, Ultrafiltration, and Size Exclusion Chromatography to Optimize the Isolation of Exosomes from Human Blood Plasma and Serum
DOI:

09:22 min

April 13, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:06Preparation of Crude Sample (Either Plasma or Serum) by Pelleting Larger Vesicles and Cellular Debris
  • 02:04Digestion of Non-exosomal Blood Proteins and Removal of Small Proteins/Peptides by Centrifuge Ultrafiltration
  • 04:21Purification of Vesicles by Size Exclusion Chromatography (SEC)
  • 05:45Concentration of Purified Exosomes/Total Protein Quantification and Quantification/Sizing of Exosomes by Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
  • 07:09Results: Increased Vesicle Yield and Exosome-specific Markers After Purification
  • 08:15Conclusion

Summary

자동 번역

ここでは、プラズマと非 exosomal 血蛋白質の減らされた共同浄化と血清の両方からエクソソームを浄化するためのプロトコルを提案する.最適化されたプロトコルには、限外ろ過には、プロテアーゼ処理, サイズ排除クロマトグラフィーが含まれます。小胞とプロテオーム解析のより正確な定量化を含むエクソソーム利点下流解析の強化された浄化。

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