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Gene-alvo Mutagenesis aleatório para selecionar heterocromatina-desestabilizando Proteassoma mutantes no fermento de fissão
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Gene-targeted Random Mutagenesis to Select Heterochromatin-destabilizing Proteasome Mutants in Fission Yeast

Gene-alvo Mutagenesis aleatório para selecionar heterocromatina-desestabilizando Proteassoma mutantes no fermento de fissão

DOI:
10.3791/57499-v

•

07:18 min

•

May 15, 2018

•

,
1Department of Biological Sciences,Korea Advanced Institute of Science and Technology

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:37Random Mutagenesis of rpt4+ by Error-prone PCR
  • 01:33Transformation of Fission Yeast by Electroporation
  • 04:01Selection of Heterochromatin-destabilizing Mutants and Checking for False Positives
  • 05:44Results: Random Mutagenesis of Heterochromatin-destabilizing Proteasome Mutants in Fission Yeast
  • 06:36Conclusion

Summary

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Este artigo descreve uma metodologia detalhada para o mutagenesis aleatório de um gene alvo no fermento de fissão. Como exemplo, temos como alvo rpt4 +, que codifica uma subunidade do proteossomo 19S e tela para as mutações que desestabilizam a heterocromatina.

Tags

Gene-targeted Random MutagenesisHeterochromatin-destabilizingProteasome MutantsFission YeastError-prone PCRTransformation-fusion ConstructElectroporationSorbitol WashHeterochromatin Formation And Maintenance

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