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Microscopia di multi-colore localizzazione delle proteine di membrana singola in organelli delle cellule di mammiferi dal vivo
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Multi-color Localization Microscopy of Single Membrane Proteins in Organelles of Live Mammalian Cells
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Microscopia di multi-colore localizzazione delle proteine di membrana singola in organelli delle cellule di mammiferi dal vivo

DOI:
10.3791/57690-v

•

11:06 min

•

June 30, 2018

•

, , , ,
1School of Biology,University of Osnabrück, 2Center of Cellular Nanoanalytics, Integrated Bioimaging Facility,University of Osnabrück, 3Department of Biology,WWU Münster

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:54Physical Alignment of Image Splitter Generated Images
  • 02:25Alignment of Spectrally Separated Channels by Software Performing Spatial Transformation
  • 04:34Single Molecule Imaging of Mitochondrial Membrane Proteins
  • 08:32Results: Multi-color Localization of Mammalian Mitochondrial PINK1
  • 10:15Conclusion

Summary

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Qui, presentiamo un protocollo per la localizzazione di multi-colore delle proteine di membrana singola in organelli delle cellule vive. Per allegare fluorofori, proteine self-etichettatura sono usate. Proteine, trova in scomparti di diverse membrane dell'organello stesso, possono essere localizzati con una precisione di ~ 18 nm.

Tags

Multi-color Localization MicroscopySingle Membrane ProteinsOrganellesLive Mammalian CellsProtein DynamicsSpatiotemporal OrganizationMitochondrial Membrane ProteinsTransfectionSample PreparationMicroscope SetupFluorescent BeadsObjective LensImmersion OilTransmission LightLaserFluorescence ChannelsImage SplitterTIRF MicroscopyTransformation MatrixDual-color ImagesCalibrationUnit ConversionLocalization ManagerPoint Spread Function (PSF)

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