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Chapters
- 00:04Title
- 00:47Preparation of Plant Cell Material
- 01:55Tandem Affinity Purification (TAP)
- 04:59Metabolite and Protein Extraction
- 06:15Results: Simultaneous Characterization of Protein-Protein and Protein-Metabolite Interactions Employing a Single-Step Tandem Affinity Purification Coupled with Mass Spectrometry
- 07:23Conclusion
Las interacciones proteína-proteína y proteína-metabolito son cruciales para todas las funciones celulares. Adjunto, describimos un protocolo que permite el análisis paralelo de estas interacciones con una proteína de elección. Nuestro protocolo fue optimizado para cultivos de células vegetales y combina la purificación de la afinidad con la proteína basada en espectrometría de masa y detección de metabolitos.
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Keywords:
Affinity PurificationProtein-protein ComplexesProtein-metabolite ComplexesParallel AnalysisBasic ResearchMedicalPharmaceuticalBiotechnologicalSmall Molecular LigandsIn Vivo ConditionsInteracting MoleculesPSBL Arabidopsis ThalianaCell CultureMSMO MediumLogarithmic Growth PhaseMixer MillLysis BufferIgG Sepharose Beads
