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Una misura quantitativa di specie reattive dell'ossigeno e senescenza-collegata di fenotipo secretivo in fibroblasti umani normali durante la senescenza indotta da Oncogene
JoVE 신문
발생학
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JoVE 신문 발생학
A Quantitative Measurement of Reactive Oxygen Species and Senescence-associated Secretory Phenotype in Normal Human Fibroblasts During Oncogene-induced Senescence
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Una misura quantitativa di specie reattive dell'ossigeno e senescenza-collegata di fenotipo secretivo in fibroblasti umani normali durante la senescenza indotta da Oncogene

DOI:
10.3791/57890-v

•

13:59 min

•

August 12, 2018

•

, ,
1Department of Biochemistry, College of Medicine,Dong-A University, 2Peripheral Neuropathy Research Center, College of Medicine,Dong-A University

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:10Inducing Oncogene-induced Senescence
  • 03:11Monitoring Senescence by Senescence Associated ß-galactosidase (SA ß-gal) Staining
  • 04:27Quantifying ROS Induction during OIS
  • 06:42Quantifying IL-6 and IL-8 mRNA Expression for SASP Anaylsis using Real-time PCR
  • 08:53Quantifying the Levels of Secreted IL-6 and IL-8 Proteins for SASP Analysis using ELISA
  • 10:56Results: Representative ROS and SASP Expression Analysis during H-Ras-induced Senescence
  • 12:25Conclusion

Summary

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ROS intracellulari è stato indicato per svolgere un ruolo importante nell'induzione della senescenza cellulare. Qui, descriviamo un test sensibile per quantificare i livelli di ROS durante la senescenza cellulare. Forniamo anche i protocolli per la valutazione del fenotipo secretivo senescenza-collegata, che secondo come riferito contribuisce a varie disfunzioni relative all'età.

Tags

Keywords: ROSReactive Oxygen SpeciesSenescence-associated Secretory PhenotypeSASPH-RasOncogene-induced SenescenceWI-38 FibroblastsIntracellular ROSIL-6IL-8BOSC CellsRetroviral DNAPolybrenePuromycinSA Beta-gal Staining

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