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Una medida cuantitativa de especies reactivas de oxígeno y senescencia asociada a fenotipo secretor en fibroblastos humanos normales durante la senescencia inducida por el oncogén
JoVE 신문
발생학
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JoVE 신문 발생학
A Quantitative Measurement of Reactive Oxygen Species and Senescence-associated Secretory Phenotype in Normal Human Fibroblasts During Oncogene-induced Senescence
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Una medida cuantitativa de especies reactivas de oxígeno y senescencia asociada a fenotipo secretor en fibroblastos humanos normales durante la senescencia inducida por el oncogén

DOI:
10.3791/57890-v

•

13:59 min

•

August 12, 2018

•

, ,
1Department of Biochemistry, College of Medicine,Dong-A University, 2Peripheral Neuropathy Research Center, College of Medicine,Dong-A University

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:10Inducing Oncogene-induced Senescence
  • 03:11Monitoring Senescence by Senescence Associated ß-galactosidase (SA ß-gal) Staining
  • 04:27Quantifying ROS Induction during OIS
  • 06:42Quantifying IL-6 and IL-8 mRNA Expression for SASP Anaylsis using Real-time PCR
  • 08:53Quantifying the Levels of Secreted IL-6 and IL-8 Proteins for SASP Analysis using ELISA
  • 10:56Results: Representative ROS and SASP Expression Analysis during H-Ras-induced Senescence
  • 12:25Conclusion

Summary

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ROS intracelular se ha demostrado para desempeñar un papel importante en la inducción de senescencia celular. Aquí, describimos un análisis sensible para cuantificar los niveles ROS durante la senescencia celular. También ofrecemos protocolos para evaluar el fenotipo secretor asociados a senescencia, que supuestamente contribuye a diferentes disfunciones relacionadas con la edad.

Tags

Keywords: ROSReactive Oxygen SpeciesSenescence-associated Secretory PhenotypeSASPH-RasOncogene-induced SenescenceWI-38 FibroblastsIntracellular ROSIL-6IL-8BOSC CellsRetroviral DNAPolybrenePuromycinSA Beta-gal Staining

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