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O ensaio de sequestro de lactato desidrogenase — Um método simples e confiável para determinar a atividade de Autophagic de sequestro em massa em células de mamíferos
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
The Lactate Dehydrogenase Sequestration Assay — A Simple and Reliable Method to Determine Bulk Autophagic Sequestration Activity in Mammalian Cells
DOI:

09:34 min

July 27, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:40Cell Seeding and Treatment
  • 02:46Cell Harvest and Preparation for Electrodisruption
  • 03:53Plasma Membrane Electrodisruption and Separation of Sedimentable- and Total Cell Fractions
  • 05:50LDH Extraction and Measurement of LDH Enzymatic Activity
  • 06:55Results: Monitoring Bulk Autophagic Sequestration Activity in Mammalian Cells
  • 08:43Conclusion

Summary

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Aqui, é descrito um protocolo simples e bem validado para medir a atividade de autophagic de sequestro em massa em células de mamíferos. O método baseia-se em quantificar a proporção de lactato desidrogenase (LDH) em frações de célula sedimentáveis em comparação com os níveis LDH totais do celulares.

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