An Oligonucleotide-based Tandem RNA Isolation Procedure to Recover Eukaryotic mRNA-Protein Complexes

Valentina Iadevaia; Ana M. Matia-Gonz&#225;lez; Andr&#233; P. Gerber

doi:10.3791/58223

Journal

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생화학

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진 핵 세포 mRNA 단백질 복합물을 복구 하는 Oligonucleotide 기반 협동 RNA 격리 절차

JoVE 신문
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An Oligonucleotide-based Tandem RNA Isolation Procedure to Recover Eukaryotic mRNA-Protein Complexes

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진 핵 세포 mRNA 단백질 복합물을 복구 하는 Oligonucleotide 기반 협동 RNA 격리 절차

DOI:

10.3791/58223-v

•

09:45 min

•

August 18, 2018

• Chapters

00:04Title
00:32Antisense Oligonucleotide (ASO) Design
02:22Protein Extract Preparation
04:08Step 1: Poly(A) RNA Isolation
05:45Step 2: Specific mRNA Capture with 3 -Biotinylated 2 -Methoxy Modified Antisense RNA Oligonucleotides
07:41Results: Capture of Specific mRNA-protein Complexes from Extracts Derived from UV Crosslinked Cells with TRIP
09:00Conclusion

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Endogenously 구성 된 mRNA 단백질 복합물의 복구에 대 한 협동 RNA 격리 절차 (여행) 설명 되어 있습니다. 특히, RNA-단백질 복합물 가교 된에서 vivo에서, polyadenylated RNAs는 격리 oligo(dT) 구슬, 추출 물 이며 특정 한 mRNAs와 수정 된 RNA 센스 oligonucleotides 캡처됩니다. 단백질 mRNAs에 바인딩된 immunoblot 분석에 의해 검색 됩니다.

진 핵 세포 mRNA 단백질 복합물을 복구 하는 Oligonucleotide 기반 협동 RNA 격리 절차

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