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Produzione su larga scala di RNA ricombinante su un'impalcatura circolare utilizzando un sistema derivato Viroid in Escherichia coli
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JoVE 신문 생화학
Large-scale Production of Recombinant RNAs on a Circular Scaffold Using a Viroid-derived System in Escherichia coli
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Produzione su larga scala di RNA ricombinante su un'impalcatura circolare utilizzando un sistema derivato Viroid in Escherichia coli

DOI:
10.3791/58472-v

•

10:38 min

•

November 30, 2018

•

, ,
1Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas,Consejo Superior de Investigaciones Científicas-Universitat Politècnica de València, Spain

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:13Plasmid Construction
  • 03:25RNA Expression
  • 04:52RNA Extraction and Purification
  • 06:40RNA Analysis
  • 07:32Results: Analysis of the Large-scale Production of Recombinant RNAs
  • 09:19Conclusion

Summary

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Qui, presentiamo un protocollo per produrre grandi quantità di RNA ricombinante in Escherichia coli co-esprimendo un RNA chimerico che contiene il RNA di interesse in un'impalcatura viroid e una pianta ligasi di tRNA. Il prodotto principale è una molecola circolare che facilita la purificazione di omogeneità.

Tags

Recombinant RNARNA ProductionCircular RNA ScaffoldViroidEscherichia ColiGibson AssemblyPCRRestriction EnzymeAgarose Gel ElectrophoresisMiniprep

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