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Análise de expressão genética das células endoteliais expostos para Shear Stress usando múltiplas câmaras de fluxo paralelo-placa
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JoVE 신문 생체공학
Gene Expression Analysis of Endothelial Cells Exposed to Shear Stress Using Multiple Parallel-plate Flow Chambers

Análise de expressão genética das células endoteliais expostos para Shear Stress usando múltiplas câmaras de fluxo paralelo-placa

DOI:
10.3791/58478-v

•

08:50 min

•

October 21, 2018

•

, , , , ,
1Institute of Medical Science,University of Toronto, 2Keenan Research Centre in the Li Ka Shing Knowledge Institute,St. Michael’s Hospital, 3Department of Laboratory Medicine and Pathobiology,University of Toronto, 4Department of Medicine,University of Toronto

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:55Assay Setup
  • 04:20Flow Assay
  • 05:18Cell Harvest and RNA Extraction
  • 06:48Results: Representative KLF2 Loss-of-Function Analysis in Human Endothelial Cells in Response to Shear Stress
  • 08:06Conclusion

Summary

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Aqui, um fluxo de trabalho para a análise de expressão de gene e cultura de células endoteliais sob tensão de cisalhamento fluido é apresentado. Incluído é um arranjo físico para habitação e monitoramento de múltiplas câmaras de fluxo em um ambiente controlado e o uso de um referência exógena do RNA por PCR quantitativo simultaneamente.

Tags

Endothelial CellsShear StressParallel-plate Flow ChambersGene Expression AnalysisAtherosclerosisLaminar FlowCell CultureFibronectinCO2 IncubatorBubble TrapCell SeedingTubingStopcock

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