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Immunoblotting quantitativa delle linee cellulari come Standard per convalidare l'immunofluorescenza per quantificare le proteine biomarcatore nei campioni di tessuto di Routine
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JoVE 신문 생물학
Quantitative Immunoblotting of Cell Lines as a Standard to Validate Immunofluorescence for Quantifying Biomarker Proteins in Routine Tissue Samples
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Immunoblotting quantitativa delle linee cellulari come Standard per convalidare l'immunofluorescenza per quantificare le proteine biomarcatore nei campioni di tessuto di Routine

DOI:
10.3791/58735-v

•

09:58 min

•

January 07, 2019

•

, , ,
1Department of Pathology and Molecular Medicine,Queen’s University, 2Division of Cancer Biology and Genetics,Queen’s Cancer Research Institute, 3Queen’s Laboratory for Molecular Pathology, Department of Pathology and Molecular Medicine,Queen’s University

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:29Building a Cell-Line Tissue Microarray (TMA)
  • 03:37Sample Staining by Immunofluorescence
  • 04:27Quantitative Immunoblotting of Cell Lines
  • 07:48Results: Immunoblotting Ratios Strongly and Positively Correlated with Intensity Readings from Quantitative IF
  • 09:22Conclusion

Summary

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Descriviamo l'uso di quantitativi immunoblotting per convalidare l'istologia di immunofluorescenza accoppiato con analisi dell'immagine come mezzo di quantificare una proteina di interesse nei campioni di tessuto formalina-fisse, paraffina (FFPE). I nostri risultati dimostrano l'utilità dell'istologia di immunofluorescenza per accertare la quantità relativa di proteine biomarcatore nei campioni di biopsia di routine.

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Keyword Extraction: Quantitative ImmunoblottingCell LinesImmunofluorescenceBiomarker ProteinsCancer PathologyImmunohistochemistryProtein QuantificationImmortalized Cell LinesMultiplexed ApproachPrimary Biopsy SamplesCentrifugationCell PelletPBSNBFAgarose Solution

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