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Immunoblotting quantitativa de linhas celulares como um padrão para validar a imunofluorescência para quantificar proteínas biomarcador em amostras de tecido de rotina
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JoVE 신문 생물학
Quantitative Immunoblotting of Cell Lines as a Standard to Validate Immunofluorescence for Quantifying Biomarker Proteins in Routine Tissue Samples

Immunoblotting quantitativa de linhas celulares como um padrão para validar a imunofluorescência para quantificar proteínas biomarcador em amostras de tecido de rotina

DOI:
10.3791/58735-v

•

09:58 min

•

January 07, 2019

•

, , ,
1Department of Pathology and Molecular Medicine,Queen’s University, 2Division of Cancer Biology and Genetics,Queen’s Cancer Research Institute, 3Queen’s Laboratory for Molecular Pathology, Department of Pathology and Molecular Medicine,Queen’s University

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:29Building a Cell-Line Tissue Microarray (TMA)
  • 03:37Sample Staining by Immunofluorescence
  • 04:27Quantitative Immunoblotting of Cell Lines
  • 07:48Results: Immunoblotting Ratios Strongly and Positively Correlated with Intensity Readings from Quantitative IF
  • 09:22Conclusion

Summary

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Nós descrevemos o uso de immunoblotting quantitativa para validar a histologia de imunofluorescência, juntamente com a análise de imagens como meio de quantificar uma proteína de interesse em amostras de tecido fixada em formol, parafina (FFPE). Nossos resultados demonstram a utilidade da histologia de imunofluorescência para determinar a quantidade relativa de proteínas biomarcador em amostras de biópsia de rotina.

Tags

Keyword Extraction:Quantitative ImmunoblottingCell LinesImmunofluorescenceBiomarker ProteinsCancer PathologyImmunohistochemistryProtein QuantificationImmortalized Cell LinesMultiplexed ApproachPrimary Biopsy SamplesCentrifugationCell PelletPBSNBFAgarose Solution

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