Identification of Functional Protein Regions Through Chimeric Protein Construction

00:04Title
00:49Chimeric Protein Design
05:00Preparation for Molecular Cloning
07:05Polymerase Chain Reaction (PCR) Amplification of the Individual DNA Fragments Forming the Chimera and to Generate the Chimeric DNA Sequence
09:22Results: Generation of the Oncostatin M BC Loop Chimera
10:55Conclusion

Summary

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Proteine strutturalmente correlate spesso esercitano funzioni biologiche distinte. Lo scambio di equivalenti regioni di queste proteine al fine di creare proteine chimeriche costituisce un approccio innovativo per identificare le aree critiche della proteina che sono responsabili della loro divergenza funzionale.

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Preparazione dei campioni per l'identificazione basati sulla spettrometria di massa di RNA-binding Regions

Biotinylated Cell-penetrating peptidi per studiare le interazioni proteina-proteina intracellulare

2 in 1: purificazione di affinità per l'analisi parallela di proteina-proteina e proteina-metabolita complessi in un unico passaggio

Immobilizzazione covalente di proteine per la spettroscopia di forza di singola molecola

Un'analisi di spettroscopia di fluorescenza fluttuazione delle interazioni proteina-proteina a contatti cellula-cellula

Alta sensibilità misura dell'affinità di legame di DNA di fattore di trascrizione per titolazione competitivo mediante microscopia a fluorescenza

Analisi della piegatura della proteina, trasporto e degradazione in cellule viventi di radioattivo Pulse Chase

Applicazione dell'interferometria biostrato (BLI) per lo studio delle interazioni tra proteine e proteine nella trascrizione

Valutazione delle interazioni tra proteine e proteine utilizzando una tecnica di digestione On-Membrane

Creazione di sistemi di dimerizzazione delle proteine altamente specifici indotta chimicamente mediante la selezione stepwise di phage di una biblioteca combinatoria di anticorpi a dominio singolo

Identificazione delle regioni di proteina funzionale attraverso la proteina chimerica costruzione

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