Journal
/
생화학
/
Utilização de proteínas recombinantes de fusão em uma plataforma de ensaio de Protease fluorescente e sua renaturalização em-gel
JoVE 신문
생화학
Author Produced
This content is Free Access.
JoVE 신문 생화학
Use of Recombinant Fusion Proteins in a Fluorescent Protease Assay Platform and Their In-gel Renaturation

Utilização de proteínas recombinantes de fusão em uma plataforma de ensaio de Protease fluorescente e sua renaturalização em-gel

DOI:
10.3791/58824-v

•

19:23 min

•

January 16, 2019

•

, , , ,
1Department of Biochemistry and Molecular Biology, Faculty of Medicine,University of Debrecen, 2Biotechnology Research Department,Gedeon Richter Plc

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:05Generation of the Substrate-coding Expression Plasmids
  • 02:16Expression of the Fluorescent Substrates
  • 03:35Cell Disruption
  • 04:26Ni-NTA Magnetic Agarose Bead-based Protease Assay
  • 12:39PAGE Analysis
  • 14:41Representative Results
  • 18:29Conclusion

Summary

자동 번역

자동 번역

Aqui, apresentamos o procedimento detalhado de uma plataforma de ensaio de protease recentemente desenvolvido utilizando o N-terminal hexahistidine/maltose-proteína e fluorescentes substratos recombinantes da proteína-fundido, anexados à superfície do níquel-nitrilotriacético grânulos de agarose magnético ácido. Também é apresentada uma análise subsequente em-gel das amostras de ensaio separados por eletroforese em gel polyacrylamide do sulfato dodecyl de sódio.

Tags

Recombinant Fusion ProteinsFluorescent Protease AssayIn-gel RenaturationHIV-1 ProteaseHigh-throughput ScreeningFluorescence-based AssayProtein ExpressionCleavage SiteBL21(DE3) CellsPlasmid Construction

Article

Embed

플레이리스트에 추가

Usage Statistics

Related Videos

check_url/kr/58824?article_type=v

Detecção altamente sensível e quantitativa de proteínas e suas isoformas pelo método isoeléctrica capilar
check_url/kr/58824?article_type=v

Um ensaio de Luciferase de alto rendimento para avaliar a proteólise de PCSK9 a Protease Single-volume de negócios
check_url/kr/58824?article_type=v

Isolamento de fisiologicamente ativo contém e a sua utilização em ensaios de transporte de energia-dependente da proteína
check_url/kr/58824?article_type=v

Como quantificar a fração de proteínas fluorescentes fotoativo a granel e em células vivas
check_url/kr/58824?article_type=v

Coloração fluorescente de prata das proteínas em gel de poliacrilamida
check_url/kr/58824?article_type=v

Localização de proteínas SUMO-modificadas usando proteínas de captura de sumo fluorescentes
check_url/kr/58824?article_type=v

Medindo interações entre sondas fluorescentes e lignina em seções de plantas por sFLIM Com base na autofluorescência nativa
check_url/kr/58824?article_type=v

Caracterização de proteínas celulares com oxidação fotoquímica rápida de proteínas
check_url/kr/58824?article_type=v

Secção Transversa de Arroz Maduro (Oryza sativa L.) Kernels para digitalização de imagens de microscopia eletrônica usando dicas de pipeta como suporte à imobilização
check_url/kr/58824?article_type=v

Incubadora de plataformas com estágio XY móvel: uma nova plataforma para implementar oxidação fotoquímica rápida em células de proteínas

Read Article