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Chapters
- 00:04Title
- 00:28Preparation of a Lipid/UQ-10/FDLL Mix
- 01:26Reconstitution of Cytochrome bo3
- 05:06Fabrication of Semi-Transparent Gold Electrodes and Modification of the Gold Surface with Self-Assembled Monolayer (SAM)
- 06:07Electrochemical Testing of Proteoliposomes Activity
- 07:46Detection of Enzymatic Proton Pumping by Fluorescence Microscopy
- 09:44Results: Liposome Identification and pH Change
- 11:35Conclusion
Qui, presentiamo un protocollo per studiare il meccanismo molecolare della traslocazione di protoni attraverso le membrane del lipido di liposomi singoli, utilizzando citocromo bo3 come esempio. Combinando elettrochimica e microscopia a fluorescenza, le variazioni del pH in lumen del singole vescicole, contenenti singole o multiple enzima, possono essere rilevati e analizzati singolarmente.
