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Nachweis von Protein-Ubiquitinationsstellen durch Peptidanreicherung und Massenspektrometrie
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Detection of Protein Ubiquitination Sites by Peptide Enrichment and Mass Spectrometry
DOI:

11:54 min

March 23, 2020

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:16Sample Preparation
  • 03:36Offline Peptide Fractionation
  • 06:16Nanoflow LC-MS/MS
  • 07:51Data Analysis
  • 09:00Results: Detection of diGly Peptides Using Nanoflow LC-MS/MS
  • 10:51Conclusion

Summary

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Wir präsentieren eine Methode zur Reinigung, Detektion und Identifizierung von diGly Peptiden, die aus ubiquitinierten Proteinen aus komplexen biologischen Proben stammen. Die vorgestellte Methode ist reproduzierbar, robust und übertrifft die veröffentlichten Methoden in Bezug auf den Grad der Tiefe der Ubiquitinom-Analyse.

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