שיטה מעבדה למדוד מדבק מפהק בחולדות

הפרוטוקול שלנו הוא משמעותי כי הוא מספק דרך קלה לחקור אילו חושים עשויים להיות מעורבים פיהוק מדבק בחולדות. השימוש בהליך לא פולשני והזמינות של תוכנת היישום, אשר מאיץ את החישוב למדידת פיהוק מדבק, הם היתרונות העיקריים של טכניקה זו. אנשים שמעולם לא ביצעו טכניקה זו לא צריכים להתמודד עם קשיים גדולים ביישום, בתנאי שהם באופן שיטתי בצע כל צעד ולבקש ייעוץ מקצועי בעת בניית מקרה התצפית.

הדגמה חזותית של שיטה זו מסייעת בהבנת ההסדר המרחבי של כלובי התצפית במהלך הניסוי. עוזר למנוע טעויות ייעוד של הטיפולים. הפגנת הליך זה תהיה אוולין Beristain-קסטילו, פוסטדוק מהמעבדה שלי.

כדי לקבוע מפגש מבחן, העבר ארבעה חולדות לחדר התצפית בכלובים בודדים. בזמן שבעלי החיים מסתגלים, מניחים שולחן הפוך בצורת T על שולחן מלבני גדול יותר מתחת למנורת תקרה שמדליקה מספיק את החדר. מניחים נייר סינון בתחתית כלוב תצפית, ומ מניחים את הכלובים בזוגות בכל צד של השולחן ההפוך בצורת T.

מקם מחיצה בין כל זוג כלובים, והצב אסטרטגית שתי מצלמות וידאו דיגיטליות, כך שכל אחת מהן מתעדת את התנהגות הפיהוק של כל זוג חולדות. לאחר אישור כי מצלמות ההצגמה קבועות גם חצובה מכוונת כראוי לכלובי התצפית, לחבר את מצלמות ההצגמה למחשב שולחני כדי לפקח בו זמנית על ההתנהגות של החולדות. כאשר בעלי החיים התאקלמו במשך 15 דקות, מניחים אותם בכלובי התצפית בהתאם להקצאה שנקבעה קודם לכן, ומגדירים את המיקוד האוטומטי לכל מצלמת וידאו.

התחל את הקלטת הווידאו ואת סטופר באותו זמן, לעצור את הקלטת הווידאו בסוף תקופת התצפית 60 דקות. כשהתצפית נגמרת, החזירו את החולדות לכלובי הבית שלהן במתקן החיות עם גישה למזון ומים. לאחר מכן לנקות ביסודיות את כלובי התצפית עם חומר ניקוי רעיל לפני הכנת הניסוי להגדיר לבצע את הפעלות הבדיקה הבאות ליום.

לאחר ההפעלה האחרונה, הפעל כל סרטון וידאו על מסך מחשב באמצעות כל מערכת הפעלה רגילה עבור צופה. תן לצופה להציג תחילה כל סרטון כדי להתבונן ולהקליט את התנהגות הפיהוק על גליונות נתונים פעם אחת במהירות רגילה, ואחריו צפייה נוספת במהירויות איטיות יותר כדי להקל על ההתבוננות והדהמה של הפיהוק. כדי להבקיע את הפיהוק, השתמש בקווים אנכיים כדי לייצג את המופע של פיהוק עם הדקה הכתובה ככתב עילי.

כאשר כל הפיהוקים כבר הבקיע, לתמלל את רצף הזמן של פיהוקים בכל חולדה לגיליון אלקטרוני. אם הפיהוק נרשם עד הדקה הקרובה ביותר, הזן את מספר הפיהוקים בכל דקה רלוונטית ושתמש באפס כדי למלא את התאים כאשר לא התרחש פיהוק בדקה נתונה. לאחר מכן שמור את גליון העבודה כקובץ טקסט.

אם הפיהוק נרשם למספר העשרוני הקרוב ביותר של דקה, הקלד את הרצף מלמעלה למטה. השתמש ב- NA כדי למלא את החללים הריקים של עמודות העכברוש שבהן מספר הפיהוקים בשורות נמוך מזה של העמודה. עם המספר המרבי של שורות של פיהוקים שתועדו עבור חולדה.

לאחר מכן שמור את גליון העבודה כקובץ טקסט. לאחר הזנת כל הנתונים, יבא את קובץ הטקסט לתוך R.Save קודי התוכנית עם קוד הסיומת R והורד את קוד התוכנית הספציפי בהתאם לשאלה אם הפיהוקים נרשמו כמספרים שלמים או כמספרי שבר. לאחר מכן הפעל את התוכנית עבור כל זוג חולדות ואת המספר הרצוי של מסגרות זמן.

בסוף הריצה, הפעל את התוכנית שוב באמצעות הפצה אקראית של מספר הפיהוקים מכל חולדה. כדי ליצור עקומות הדבקה מפהקים, השתמש בנתונים שנשמרו בעבר בגיליון האלקטרוני כדי להפחית את שיעורי אי ההדבקה מתעריפי ההדבקה של כל זוג חולדות, חלון הזמן ומצב הבדיקה, תוך הפרדת ניתוח הנתונים שנצפו ונתונים מלאכותיים. בניסוי מייצג זה נמדדה ההדבקה הפיהוק בין חולדות זכריות לא מוכרות על פני מגוון חלונות זמן שנעים בין 1 ל-10 דקות.

עקומות ההדבקה הפיהוק האלה מצביעות על כך שרק תקשורת חוש הריח בין חולדות בכלובים עם מחיצה אטומה מחוררת הציגה הדבקה מפהק. מה שניכר מחלון הזמן הרביעי והלאה, שכן מרווח הביטחון של הממוצעים אינו חופף למרווח הביטחון של מספר הפיהוקים שהוקצה באופן אקראי במהלך 60 הדקות. הלהקה ציינה, כצפוי, כי הקצאה אקראית של מספר הפיהוקים בכל חולדה בתקופת התצפית, הפיקה שיעורי פיהוק שהתנווו בערך באפס מבלי להדגים דפוס נראה לעין.

בניסוי מייצג זה עם חולדות זכר מוכרות, אף אחד מארבעת מצבי הבדיקה לא עורר הידבקות פיהוק מכיוון שמרווחי הביטחון שלהם חופפים עם רצועת מרווחי הביטחון שנוצרה באופן אקראי. יתר על כן, לא היו הבדלים בין ארבעת מצבי הבדיקה למרות העלייה הכוללת בהדבקה פיהוק על פני 10 חלונות זמן שונה מדרון אפס. זכור לעקוב אחר הזהויות המוכרות והלא מוכרות של החולדות לפרשנות נכונה של התוצאות, ולנקות את כלובי התצפית בין הניסויים.

הליך תרופתי עשוי לשמש כדי לחסום תקשורת שמיעתית, ולהפריד לחלוטין את השפעות השמיעה על פיהוק מדבק מן ההשפעות מן החושים האחרים. טכניקה זו סללה את הדרך להשוואת פיהוק מדבק בין המינים הן מבחינת החושים המעורבים והן מבחינת עוצמת התגובה על ידי השוואת עקומות הפיהוק המדבקות. זכור לטפל בזהירות בכלובי התצפית כי הם יכולים בטעות לשבור ולגרום לפציעות.