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Cromatografia a scambio ionico (IEX) accoppiata alla diffusione della luce multi-angolo (MALS) per la caratterizzazione e la separazione delle proteine
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Ion Exchange Chromatography (IEX) Coupled to Multi-angle Light Scattering (MALS) for Protein Separation and Characterization
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Cromatografia a scambio ionico (IEX) accoppiata alla diffusione della luce multi-angolo (MALS) per la caratterizzazione e la separazione delle proteine

DOI:
10.3791/59408-v

•

10:41 min

•

April 05, 2019

•

, , ,
1Wolfson Centre for Applied Structural Biology, The Alexander Silberman Institute of Life Science,The Hebrew University of Jerusalem, 2Wyatt Technology Corporation, 3Danyel Biotech Ltd

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:50Preparation of the Buffer
  • 02:10IEX-MALS Experiment
  • 05:38Analysis of IEX-MALS Experimental Data
  • 08:27Results: Optimization of IEX-MALS Experiment for BSA
  • 10:02Conclusion

Summary

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Questo protocollo descrive l'uso della cromatografia di scambio ionico ad alta specificità con dispersione della luce multi-angolo per un'accurata determinazione della massa molare di proteine, complessi di proteine e peptidi in un campione eterogeneo. Questo metodo è prezioso per la valutazione di qualità, anche per quanto riguarda la caratterizzazione di oligomeri nativi, carica varianti ed esempi di misto-proteina.

Tags

Ion Exchange ChromatographyIEXMulti-angle Light ScatteringMALSProtein SeparationProtein CharacterizationProtein Quality ControlOligomeric StateHomogeneityIdentityConformationStructurePost-translation ModificationsAnion ExchangeAIEXCation ExchangeCIEXBSABufferFPLCDLS

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