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Uso di singola molecola fluorescente ibridazione In Situ (SM-pesce) per quantificare e Localize mRNAs in ovociti murini
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Use of Single Molecule Fluorescent In Situ Hybridization (SM-FISH) to Quantify and Localize mRNAs in Murine Oocytes
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Uso di singola molecola fluorescente ibridazione In Situ (SM-pesce) per quantificare e Localize mRNAs in ovociti murini

DOI:
10.3791/59414-v

•

08:18 min

•

April 24, 2019

•

,
1Department of Animal Science,University of Nebraska-Lincoln

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:38Collection of Ovulated Oocytes from Female Mice
  • 02:06SM-FISH Staining of Oocytes
  • 04:21Image Processing
  • 06:21Results: mRNA Quantification Results using the Spot Finding and Tracking Program
  • 07:45Conclusion

Summary

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Per riproducibile contare i numeri dei mRNAs in singoli ovociti, in situ di fluorescenza di singola molecola del RNA (RNA-pesce) l'ibridazione è stato ottimizzato per cellule non aderenti. Gli ovociti sono stati raccolti, ibridata con le sonde specifiche di trascrizione e quantificati tramite un software di quantificazione di immagine.

Tags

Single Molecule Fluorescent In Situ Hybridization (SM-FISH)MRNA QuantificationMRNA LocalizationMurine OocytesNanogPou5f1DapBOocyte PreparationFixationPermeabilizationProtease TreatmentProbe Hybridization

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