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Uso de uma única molécula fluorescente hibridação In Situ (FISH-SM) para Quantify e Localize os mRNAs em oócitos murino
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Use of Single Molecule Fluorescent In Situ Hybridization (SM-FISH) to Quantify and Localize mRNAs in Murine Oocytes

Uso de uma única molécula fluorescente hibridação In Situ (FISH-SM) para Quantify e Localize os mRNAs em oócitos murino

DOI:
10.3791/59414-v

•

08:18 min

•

April 24, 2019

•

,
1Department of Animal Science,University of Nebraska-Lincoln

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:38Collection of Ovulated Oocytes from Female Mice
  • 02:06SM-FISH Staining of Oocytes
  • 04:21Image Processing
  • 06:21Results: mRNA Quantification Results using the Spot Finding and Tracking Program
  • 07:45Conclusion

Summary

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Para reproducibly contar os números dos mRNAs em oócitos individuais, fluorescência única molécula de RNA in situ hibridação (RNA-FISH) foi otimizada para células não-aderentes. Oócitos foram coletados, hibridizados com sondas específicas transcrição e quantificados usando um software de quantificação de imagem.

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Keywords: Single Molecule Fluorescent In Situ Hybridization (SM-FISH)MRNA QuantificationMRNA LocalizationMurine OocytesNanogPou5f1DapBOocyte PreparationFixationPermeabilizationProtease TreatmentProbe Hybridization

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