トランスレーショナル血管化複合体他家移植研究のためのラットにおける修正 Heterotopic 後肢 Osteomyocutaneous フラップモデル

臨床的に行われた少数の血管化複合同種移植は、移植片拒絶の根本的な原因を研究するために、信頼性の高い再現性のある動物モデルを必要とする。皮膚、筋肉、骨などの臨床的に関連する組織はすべてモデルに存在する。さらに、私たちのモデルの非機能的な性質は、より速い手術、フラップのためのより少ない虚血時間、およびVCAの異形性モデルと比較して低い罹患率を可能にする。

手移植レシピエントでは、ドナー血管の血管障害は、血管の完全閉鎖、および移植された手への虚血損傷につながる可能性があります。このモデルは、これらの血管性事象の開発を研究するためのツールです。この外科モデルを試みる前に、一次外科医は大血管外科技術に精通し、熟練しているべきである。

これは複雑で長い手順です。視覚的なデモンストレーションは、他のラボがそれに応じて準備し、手術のステップを理解するのに役立ちます。まず、鼠径部の顆窩に皮膚切開を行い、大腿骨血管を露出させることによって、ドナーラットの後肢を収穫する。

腹側皮膚切開を行い、ペディクルの解剖に役立ちます。膝と足首の崩壊後、後部皮膚切り傷を行い、ペディクルを移植片を解放し、移植片を受け手の手術台に直ちに輸送し、レシピエント動物の手術部位を事前に準備して移植片の虚血時間を最小限に抑える。レシピエント動物では、以前のように大腿血管を露出して解剖し、移植片、静脈エンドツーサイド、動脈をエンドツーエンドで吻合する。

移植片をイングイナルポケットに入れ、逆さまに向けます。最後に、皮膚を縫合する。処置を開始するには、麻酔ドナーラットを剃り、脱毛クリームを使用します。

スクラフ領域に皮下に30単位のヘパリンを注入する。動物のスパインを加熱パッドに置き、脚の後ろ面を含む外科領域を準備、スクラブ、およびドレープすることによって無菌外科分野を作り出す。メスの刃番号15を使用して、ドナーラットの鼠径部の凹部に3センチメートルの皮膚切開を行います。

虹彩はさみを使用して、イングイナル脂肪パッドを横に反射させます。綿棒で鈍い解剖を使用して、一般的な大腿血管を露出させ、弾性バンドを持つワイヤーフックを置いて腹筋を引き込みます。最大40倍の顕微鏡の下で、マイクロハサミ、3番目のストレートジュエラー鉗子、および数5つの45度角の鉗子を使用して、うつれ状靭帯下の一般的な大腿血管の出現から近位的にペディクルを解剖し、ポピタル血管の合流に遠位する。

マイクロクリップとバイポーラジュエラーを使用して鉗子、リゲートし、主要な大腿骨血管を動員するために大きな動脈および静脈枝を分割する。細かいバイポーラ鉗子を使用して、小さな枝を焼灼します。アイリスはさみを使用して、前の皮膚の中心から、後肢の腹側に沿って足首の領域に切り取られた皮膚切開を行います。

肉体の筋肉とその下の他の内転筋を垂直に切断し、内側近位性血管、深く分岐する小さな血管、坐骨神経を露出させ、液化する。この時点で、別の外科用表で、他の外科医は、移植片の配置に間に合うようにレシピエント手術部位を準備するためにレシピエント動物を挿管し、麻酔し、移植片の虚血時間を最小限に抑えるべきである。膝と足首のレベルで周回皮膚切開を行い、膝と足首を分別し、余分な筋肉と組織を取り除きます。

後肢の後肢側に垂直皮膚切開を行い、線維と脛骨だけで構成された移植片を解放し、今ではペディクルによってのみ接続される。大腿動脈と静脈にできるだけ近い位置に小さなクランプを置き、脳靱帯にできるだけ近いペディクルを切断します。血液の移植片をフラッシュするために大腿動脈にヘパリン化生理的な生理を注入するために27ゲージのフラッシュ鈍いカニューレを使用してください。

分離された移植片を温かい生理的に浸したガーゼで包み、レシピエント動物と一緒にすぐにテーブルに運び、外科的部位はすでに血管吻合のために準備されている。受け取ったラットを挿管し、2.5〜3%気化したイソファルランで深く麻酔し、1分あたり1リットルの酸素とバランスを取る。動物のスパインを加熱パッドの上に置き、外科部位をスクラブしてドレープする。

最初の外科医がドナー動物から移植片を解放することに取り組んでいる間、メスの刃番号15を使用して、麻酔を受けたレシピエントラットの鼠径部の小ささの3センチメートルの皮膚切開を行う。虹彩はさみを使用して、イングイナル脂肪パッドを横に反射させます。ドナー動物と同じ方法で一般的な大腿血管を露出させた後、腹部の筋肉を引っ込めるために弾性バンドを持つワイヤーフックを置きます。

その後、マーフィーの枝をリゲートし、分割します。10-0ナイロン中断縫合糸、吻合ドナー容器を使用して。静脈エンドツーサイド技術を介して船舶を受け取る。

次に、エンドツーエンドの技術を介して動脈吻膜を行う。徐々にクランプを解放した後、出血のための鼻血のサイトを監視し、必要に応じて、追加の縫合を追加します。効果的な移植片再灌流を保証するために、血管吻合を目視で評価する。

次に、移植片をインギナルポケットに入れ込み、足首関節を上にして逆さまに向け、膝関節を劣る。隣接する筋肉に移植片を固定するために縫合糸をタックを使用してください。最後に、中断された水平マットレス皮膚吸収性4〜0縫合を介して皮膚を閉じ、原稿に記載されているように術後のケアを続ける。

ラットVCA異所性後肢骨髄切片フラップモデルは、免疫抑制下での長期同種移植片の生存を可能にする。フラップは鼠径部に十分に隠されており、動物に対する罹患率と不快感を最小限に抑えます。免疫抑制治療を停止すると、移植片は拒絶された。

同種移植片のドップラー画像は、VCA後すぐに最小限の血液拡散から64日目のフラップの完全な再血管化へのシフトを示す。45日目の同種同種同種移植片の皮膚生検は、皮膚成分の正常な形態を示すが、75日目の拒絶反応では同種同種同種移植片中に萎縮および単核細胞浸潤があるのに対し、免疫抑制剤の低用量で毎日治療される。45日目の同系同種同種移植片の筋生検は正常形態を示すのに対し、筋肉萎縮および単核細胞浸潤は98日目の拒絶反応において同種同種同種移植片において明らかであり、免疫抑制剤の低用量で毎日治療される。

45日目の同種同種同種移植片の大腿動脈生検は、98日目の拒絶反応における同種同種同種移植片の大腿動脈とは対照的に、免疫抑制剤の低用量で毎日治療される動脈の正常な形態を示す。このモデルは、急性拒絶反応、慢性拒絶反応、および感染や外科的侮辱などの環境要因が血管障害の発症に及ぼす影響をテストするためのツールを提供する。免疫抑制薬は、移植片の長期生存のために必要とされる。

これらの薬物は化学的に危険であり、注意深く、適切な人員保護具で取り扱われるべきである。