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Saggio reporter di luciferase basato su RNA trascritto in vitro per il regolamento di traduzione dello studio nelle cellule infettate da Poxvirus
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Chapters
- 00:04Title
- 00:42DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
- 03:20mRNA Generation by In Vitro Transcription
- 04:22Cells Transfection with mRNA
- 06:04Luciferase Activity Measurement
- 07:29Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
- 08:21Conclusion
Presentiamo un protocollo per studiare la regolazione della traduzione di mRNA nelle cellule infettate da Poxvirus usando il saggio reporter di luciferasi basato sull'RNA trascritto in vitro. Il saggio può essere utilizzato per studiare la regolazione della traduzione da parte di CIS-elementi di un mRNA, tra cui 5'-non tradotto regione (UTR) e 3'-UTR. Diverse modalità di avvio della traduzione possono anche essere esaminate utilizzando questo metodo.
