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腫瘍細胞におけるマイクロRNAレベル、機能、および関連する標的遺伝子を評価するためのインビトロプロトコル
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An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells
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腫瘍細胞におけるマイクロRNAレベル、機能、および関連する標的遺伝子を評価するためのインビトロプロトコル

DOI:
10.3791/59628-v

•

09:45 min

•

May 21, 2019

•

, , ,
1Department of Biomedical Science and Research Institute for Bioscience & Biotechnology,Hallym University

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:06MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
  • 02:03Sulforhodamine B (SRB) Assay
  • 03:20Generation of a Dose-response Curve
  • 04:35Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
  • 06:37Luciferase Assay
  • 07:52Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
  • 08:53Conclusion

Summary

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このプロトコルは、プローブベースのリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、スルフォルホダミンB(SRB)アッセイ、3'未翻訳領域(3'UTR)クローニング、および目的のmiRNAの標的遺伝子を検証し、miRNAの機能を理解するためにルシフェラーゼアッセイを使用します。

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MicroRNAMicroRNA TargetIn Vitro ProtocolTumor CellsCell Viability AssayTransfectionMicroRNA MimicMicroRNA-107

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