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量化龙脑中的亚细胞泛基蛋白-蛋白酶体活性
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Quantifying Subcellular Ubiquitin-proteasome Activity in the Rodent Brain
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量化龙脑中的亚细胞泛基蛋白-蛋白酶体活性
DOI:
10.3791/59695-v
•
09:25 min
•
May 21, 2019
•
Taylor McFadden
,
Rishi K. Devulapalli
,
Timothy J. Jarome
2
1
Department of Animal and Poultry Sciences
,
Virginia Polytechnic Institute and State University
,
2
School of Neuroscience
,
Virginia Polytechnic Institute and State University
Chapters
00:04
Title
00:44
Nuclear and Cytoplasmic Extraction
02:31
Synaptic Fraction Collection
03:45
Proteasome Activity Assay
06:36
Quantification of Linkage-specific Protein Ubiquitination
07:34
Results: Differential Subcellular Changes in Proteasome Activity and Protein Polyubiquitination in the Rat Amygdala Following Learning
09:13
Conclusion
Summary
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该协议旨在有效地量化啮齿动物大脑不同细胞舱中的泛泛蛋白-蛋白酶体系统(UPS)活性。用户能够检查UPS在同一动物中核、细胞质和突触分数的功能,从而减少执行这些复杂分析所需的时间和动物数量。
Tags
Subcellular Fractionation
Ubiquitin-proteasome System
Protein Ubiquitination
Proteasome Activity
Rodent Brain
Cytoplasmic Fraction
Nuclear Fraction
Synaptic Fraction
Centrifugation
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