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フローサイトメトリーによるBKポリオマウイルス非コード制御領域駆動転写活性の測定
JoVE 신문
유전학
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JoVE 신문 유전학
Measurement of BK-polyomavirus Non-Coding Control Region Driven Transcriptional Activity Via Flow Cytometry
DOI:

11:54 min

July 13, 2019

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Chapters

  • 00:00Title
  • 01:15Collection of Blood and or Urine Samples and Isolation of BKPyV-DNA
  • 02:11Amplification and Sequencing of the Non-coding Control Region (NCCR)
  • 03:37Cloning of the Non-coding Control Region (NCCR) into the Dual Fluorescence Reporter
  • 05:26Transient Transfection of HEK293T Cells with the Dual Fluorescence Reporter Plasmid and Treatment with Potential Antiviral Agents
  • 07:23Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry
  • 09:22Results and Data Interpretation
  • 11:26Conclusion

Summary

자동 번역

この原稿では、tdTomatoおよびeGFPを発現する双方向レポータープラスミドをトランスフェクトしたHEK293T細胞を用いてBK-ポリオマウイルス転写活性のFACSベースの測定を行うプロトコルが提示される。この方法はさらに、ウイルス転写に対する新規化合物の影響を定量的に決定することを可能にする。

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