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哺乳類細胞におけるCRISPRベースの遺伝子スクリーンのプール
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Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells
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哺乳類細胞におけるCRISPRベースの遺伝子スクリーンのプール

DOI:
10.3791/59780-v

•

00:09 min

•

September 04, 2019

•

, , , ,
1Donnelly Centre,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Institute for Biomaterials and Biomedical Engineering,University of Toronto

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:36Pooled CRISPR sgRNA Lentiviral Library Plasmid Amplification
  • 02:24Large-scale CRISPR sgRNA Library Lentivirus Production
  • 03:47Primary Screen Infection, Selection, and Cell Passaging
  • 05:41CRISPR Sample Preparation and Sequencing
  • 06:43Results: Genome-scale CRISPR Screening
  • 07:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

CRISPR-Cas9技術は、あらゆる細胞型の哺乳類ゲノムを正確に編集する効率的な方法を提供し、ゲノム全体の遺伝スクリーンを実行する新しい手段を表します。プールされたゲノム全体のCRISPR-Cas9スクリーンのパフォーマンスを成功させるには必要な手順を説明する詳細なプロトコルをここで提供します。

Tags

CRISPRGenetic ScreensMammalian CellsDrop-out ScreensGuide LibrariesEssential GenesCancerDrug MechanismsCell LinesLentivirusAntibiotic SelectionPlasmid TransformationElectrocompetent CellsLBCarbenicillinPlasmid Purification293T CellsTransfection

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