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実用的で実現可能な方法のセットを使用してRAFファミリーキナーゼの疾患関連変異体を特徴付けます
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JoVE 신문 암 연구학
Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods
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実用的で実現可能な方法のセットを使用してRAFファミリーキナーゼの疾患関連変異体を特徴付けます

DOI:
10.3791/59795-v

•

07:49 min

•

July 17, 2019

•

, , , , ,
1The Laboratory of Cancer Signaling, Division of Cellular and Molecular Research,National Cancer Centre Singapore, 2The Cancer and Stem Cell Program,Duke-NUS Medical School

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:21In Vitro Kinase Assay
  • 03:08RAF Co-activation Assay
  • 04:14Complimentary Split Luciferase Assay
  • 05:53Results: RAF Family Kinase Disease-related Mutant Characterization
  • 07:13Conclusion

Summary

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本稿では、インビトロキナーゼアッセイ、RAF共活性化アッセイ、および相補的なスプリットルシフェラーゼアッセイを含む、RAFファミリーキナーゼの疾患関連変異体を特徴付けるための実用的かつ実行可能な方法のセットを提示した。

Tags

RAF KinaseDisease-related MutantsCharacterizationCatalytic ActivityFlag-taggedGlutathione S-transferase293T CellsLysis BufferAnti-FLAG Affinity BeadsKinase ReactionSDS-PAGEImmunoblot

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