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NMR-based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases
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NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases
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NMR-based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

DOI:
10.3791/59928-v

•

10:24 min

•

June 30, 2019

•

, , , , , , , , , , ,
1Department of Chemistry,Adelphi University, 2Department of Chemistry,Washington University in St. Louis, 3Department of Chemistry,Boston University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:59Initial Test Compound Assay
  • 05:01Detergent Counter Screen Assay
  • 06:19Jump-Dilution Counter Screen Assays
  • 07:56Results: Representative Nuclear Magnetic Resonance (NMR)-Based Assay Results
  • 09:28Conclusion

Summary

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NMR-basierte Aktivitätsassays wurden entwickelt, um Inhibitoren von zwei Nukleosid-Ribohydrolase-Enzymen zu identifizieren und zu charakterisieren. Es werden Protokolle für anfängliche zusammengesetzte Assays mit 500 m und 250 M, Dosis-Wirkungs-Assays zur Bestimmung der IC-50-Werte, Waschmittel-Gegensieb-Assays, Jump-Dilution-Zähler-Screen-Assays und Assays in E. coli-Vollzellen bereitgestellt.

Tags

NMR-based Activity AssaysEnzyme InhibitionIC50 ValuesArtifact DetectionWhole-cell ActivityNucleoside RibohydrolasesFragment ScreeningTrichomonas VaginalisAnti-trichomonal DrugsReagent VolumesReaction ComponentsSubstrate PreparationTest Compound PreparationReaction Stock SolutionReaction InitiationReaction Quenching

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