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Einführung eines Gene Knockout direkt in die Amastigote-Phase von Trypanosoma cruzi mit dem CRISPR/Cas9-System
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Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System
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Einführung eines Gene Knockout direkt in die Amastigote-Phase von Trypanosoma cruzi mit dem CRISPR/Cas9-System

DOI:
10.3791/59962-v

•

06:13 min

•

July 31, 2019

•

, , ,
1Biomedical Research Institute,National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST)

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:35Differentiation of Trypomastigotes into Extracellular Amastigotes
  • 01:54Electroporation of Extracellular Amastigotes
  • 03:01Monitoring the Growth of Knockout Cells
  • 04:35Results: Growth Monitoring and Phenotypic Differences of Knockout Parasites
  • 05:41Conclusion

Summary

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Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Einführung eines Genknockouts in den extrazellulären Amastigot von Trypanosoma cruzi, mit dem CRISPR/Cas9-System. Dem Wachstumsphänotyp kann entweder durch Zellzählung der axtischen Amastigotenkultur oder durch Proliferation intrazellulärer Amastigoten nach der Invasion der Wirtszelle gefolgt werden.

Tags

Keywords: Gene KnockoutCRISPR/Cas9Trypanosoma CruziAmastigoteHost Cell InfectionParasitologyExtracellular AmastigotesTrypomastigotesCell CultureElectroporation

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