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Presentazione di un Gene Knockout direttamente nello stadio Amastigote di Trypanosoma cruzi Utilizzando il sistema CRISPR/Cas9
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Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System
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Presentazione di un Gene Knockout direttamente nello stadio Amastigote di Trypanosoma cruzi Utilizzando il sistema CRISPR/Cas9

DOI:
10.3791/59962-v

•

06:13 min

•

July 31, 2019

•

, , ,
1Biomedical Research Institute,National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST)

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:35Differentiation of Trypomastigotes into Extracellular Amastigotes
  • 01:54Electroporation of Extracellular Amastigotes
  • 03:01Monitoring the Growth of Knockout Cells
  • 04:35Results: Growth Monitoring and Phenotypic Differences of Knockout Parasites
  • 05:41Conclusion

Summary

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Qui, descriviamo un protocollo per introdurre un knockout genico nell'amastigote extracellulare di Trypanosoma cruzi, usando il sistema CRISPR/Cas9. Il fenotipo della crescita può essere seguito sia dal conteggio cellulare della coltura degli amastigote axenico, sia dalla proliferazione degli amastigoti intracellulari dopo l'invasione delle cellule ospiti.

Tags

Gene KnockoutCRISPR/Cas9Trypanosoma CruziAmastigoteHost Cell InfectionParasitologyExtracellular AmastigotesTrypomastigotesCell CultureElectroporation

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