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Améliorer la précision de l'évaluation cytométrique du débit du potentiel de membrane mitochondriale dans les cellules hématopoïétiques de tige et d'ancêtre grâce à l'inhibition des pompes d'Efflux
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Improving the Accuracy of Flow Cytometric Assessment of Mitochondrial Membrane Potential in Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Through the Inhibition of Efflux Pumps
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Améliorer la précision de l'évaluation cytométrique du débit du potentiel de membrane mitochondriale dans les cellules hématopoïétiques de tige et d'ancêtre grâce à l'inhibition des pompes d'Efflux

DOI:
10.3791/60057-v

•

07:17 min

•

July 30, 2019

•

, ,
1Ruth L. and David S. Gottesman Institute for Stem Cell and Regenerative Medicine Research,Albert Einstein College of Medicine, 2Departments of Cell Biology and Stem Cell Institute,Albert Einstein College of Medicine, 3Department of Medicine,Albert Einstein College of Medicine, 4Albert Einstein Cancer Center and Diabetes Research Center,Albert Einstein College of Medicine

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:43Bone Marrow Isolation
  • 02:22Immunostaining for Detection of Hematopoietic Stem Cells
  • 03:28TMRM Staining
  • 04:17Flow Cytometry
  • 05:38Results: Flow Cytometry Analysis of Mitochondrial Membrane Potential
  • 06:33Conclusion

Summary

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Les pompes à efflux xénobiotiques sont très actives dans les cellules hématopoïétiques des tiges et des progéniteurs (HSPC) et provoquent l'extrusion de TMRM, un colorant fluorescent potentiel de membrane mitochondriale. Ici, nous présentons un protocole pour mesurer avec précision le potentiel de membrane mitochondriale dans HSPCs par TMRM en présence de Verapamil, un inhibiteur de pompe d'efflux.

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Flow CytometryMitochondrial Membrane PotentialHematopoietic Stem CellsProgenitor CellsEfflux PumpsTMRMVerapamilBone Marrow IsolationLineage CocktailCD135

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